ACROBiosystems社 Mabsol® ビオチン化タンパク質コレクション
Mabsol® biotynylated protein collection
PrecisionAviシリーズ UltraLysシリーズ
ビオチンとアビジン/ストレプトアビジンの結合は非常に強く、特異的でありタンパク質の生化学実験において非常に有用なツールです。しかし、高品質なビオチン化タンパク質を製造するためには大きな課題があり、十分なビオチン標識が出来ない、バッチ間格差が大きい、想定外の挙動を示すなど様々な問題が発する可能性があります。さらに、ビオチン標識手法の違いが、結果に大きな違いを生じさせます。目的のタンパク質ごとに特有の生化学的特徴を持っているため、その特徴に合わせた解決策（ビオチン標識法）を選択しなければいけません。
このような要因が、ラボ内でビオチン化タンパク質を作成・使用することを困難にしております。さらに市販のビオチン化タンパク質は多くありません。この現状を打開するため、ACROBiosystems社では、ビオチン標識済で、実験的に検証されたリコンビナントタンパク質を包括的に開発、製造しました。Mabsol® biotinylated protein collectionには、100種類以上の一般的な新薬候補やバイオマーカータンパク質が含まれています。同社では高品質ヒトタンパク質を材料とし、優れた生物活性と検出感度を示すビオチン化タンパク質を製造しています。また、ロット間差を最小にするために、厳しい品質チェックを実施しています。
Mabsol® biotinylated protein collectionには2種類のユニークな商品シリーズがあります。両シリーズとも、製造工程には細心の注意を払っております。
●AvitagTM technologyで製造したPrecisionAviシリーズ
●同社独自の化学標識技術で製造したUltraLysシリーズ
商品説明
PrecisionAviシリーズ
このシリーズの商品はAvitagTM技術を用いて製造されています。15アミノ酸ペプチドであるAviタグは発現ベクター構築の際にリコンビナントタンパク質に組み込まれ、Aviタグ内のリシン残基は大腸菌ビオチンリガーゼBirAによりビオチン化されます。
このAviタグのリシン残基を利用した酵素的標識技術は、一般的な結合アッセイに多くのアドバンテージをもたらします。ビオチン化はAviタグのリシン残基上だけで起こるため、標的タンパク質元来の結合部位を干渉しません。さらに、タンパク質中のAviタグの位置は正確に制御されているため、アビジンコートしたプレートなどでは、タンパク質のオリエンテーションを決定することが可能です。
商品リスト （容量などその他商品情報はエクセル商品リストにて確認してください）
| PCSK9 | |
| PC9-H82E7 | Biotinylated Human PCSK9, Avi Tag (Avitag™) |
| PCY-H82E7 | Biotinylated Human PCSK9 (D374Y), Avi Tag (Avitag™) |
| PC9-M82E1 | Biotinylated Mouse PCSK9, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1 | |
| PD1-M82F4 | Biotinylated Mouse PD-1 / PDCD1, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-H82F2 | Biotinylated Human PD-1 / PDCD1, His Tag & Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-H82E4 | Biotinylated Human PD-1 / PDCD1 (recommended for biopanning), Avi Tag (Avitag™) |
| PDL1 | |
| PD1-H82F3 | Biotinylated Human PD-L1 / B7-H1, His Tag & Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-M82F5 | Biotinylated Mouse PD-L1 / B7-H1, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| PD1-H82E5 | Biotinylated Human PD-L1 / B7-H1 (recommended for biopanning), Avi Tag (Avitag™) |
| PDL2 | |
| PD2-H82E8 | Biotinylated Human PD-L2 / B7-DC Protein (recommended for biopanning), Avi Tag (Avitag™) |
| PD2-H82F6 | Biotinylated Human PD-L2 / B7-DC, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| FcRn | |
| FCM-M82W6 | Biotinylated Mouse FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| FCM-H82W4 | Biotinylated Human FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| FCM-C82W5 | Biotinylated Cynomolgus / Rhesus macaque FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| FCM-R82W7 | Biotinylated Rat FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) |
| EGFR | |
| EGR-H82E7 | Biotinylated Human EGF R, Avi Tag (Avitag™) |
| TNF-alpha | |
| TNA-H82E3 | Biotinylated Human TNF-alpha (HPLC-verified), Avi Tag (Avitag™) |
| TNA-M82E9 | Biotinylated Mouse TNF-alpha (HPLC-verified), Avi Tag (Avitag™) |
| CTLA-4 | |
| CT4-C82E5 | Biotinylated Cynomolgus CTLA-4, Avi Tag (Avitag™) |
| CT4-H82E4 | Biotinylated Human CTLA-4, Avi Tag (Avitag™) |
| CT4-H82F3 | Biotinylated Human CTLA-4, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| OX40 | |
| OX0-H82F7 | Biotinylated Human OX40, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| VEGF | |
| VE1-H82E7 | Biotinylated Human VEGF121, Avi Tag (Avitag™) |
| CD40 | |
| CD0-H82F2 | Biotinylated Human CD40 / TNFRSF5, His Tag & Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| CD47 | |
| CD7-H82F6 | Biotinylated Human CD47, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| IgG Fc | |
| IG1-H82E2 | Biotinylated Human IgG1 Fc, Avi Tag (Avitag™) |
| IGA-M8210 | Biotinylated Mouse IgG2a Fc, Avi Tag (Avitag™) |
| TIGIT | |
| TIT-H82F1 | Biotinylated Human TIGIT Protein, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| TIT-H82E5 | Biotinylated Human TIGIT Protein, Avi Tag (Avitag™) |
| VISTA | |
| B75-H82E1 | Biotinylated Human B7-H5 / Gi24 / VISTA, Avi Tag (Avitag™) |
| HVEM / TNFRSF14 | |
| HV4-H82F1 | Biotinylated Human HVEM / TNFRSF14, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RI/CD64 | |
| CD4-M52E8 | Biotinylated Mouse Fc gamma RI / CD64, Avi Tag (Avitag™) |
| IGF-II | |
| IG2-H82F9 | Biotinylated Human IGF-II, Fc Tag, Avi Tag (Avitag™) |
| EGF R (vIII) | |
| EGR-H82E0 | Biotinylated Human EGF R (vIII), Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIA/CD32a | |
| CDA-H82E7 | Biotinylated Human Fc gamma RIIA / CD32a (R131), Avi Tag (Avitag™) |
| CDA-H82E6 | Biotinylated Human Fc gamma RIIA / CD32a (H131), Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIB/CD32b | |
| CDB-H82E0 | Biotinylated Human Fc gamma RIIB / CD32b, Avi Tag (Avitag™) |
| CDB-M82E8 | Biotinylated Mouse Fc gamma RIIB / CD32b, Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIIA/CD16a | |
| CDA-H82E8 | Biotinylated Human Fc gamma RIIIA / CD16a (F158), Avi Tag (Avitag™) |
| CDA-H82E9 | Biotinylated Human Fc gamma RIIIA / CD16a (V158), Avi Tag (Avitag™) |
| Fc gamma RIIIB/CD16b | |
| CDB-H82E1 | Biotinylated Human Fc gamma RIIIB / CD16b, Avi Tag (Avitag™) |
下記のリストはACROBiosystems社で開発中のビオチン標識タンパク質のリストです。こちらのプレオーダーも受けしておりますので、ご興味がありましたら東京未来スタイルまでお問い合わせください。
| 4-1BB | CD30 | CD33 | OX40 | CD40/TNFRSF5 | CD47 |
| CD80/B7-1 | FOLR1 | LDLR | SIRPA/CD172a | TIM3/HAVCR2/KIM3 | BACE |
| CD147 | CD4 | B7H4 | CD38 | cMet | CSF1R |
| EPCAM | ErbB3 | IL-5 | VEGFR2 | CD22/SIGLEC2 | INSR |
| CD86 | B7-H5 | TNFR1 | GCSFR | CEACAM1 | IL2R |
| IL6R | IL5R | CD319 | TRAILR1 | TRAILR2 | TRAILR4 |
| IL-10 | IL-1a | IL-4 | IL-6 | CRP/C-Reactive | VEGFR1 |
※ビオチン化されていないAviタグ標識タンパク質もご要望に応じ作成します。
UltraLysシリーズ
このシリーズの商品はACROBiosystems社独自の化学的修飾法を用いて製造されています。リシン残基側鎖のアミンおよびタンパク質N末端がビオチン化されます。
化学的標識の場合、一般的に、1つのタンパク質分子に対し複数のビオチンが結合すため、検出感度の向上が期待されます。
商品リスト
| PD1 | |
| PD1-M8259 | Biotinylated Mouse PD-1 / PDCD1, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CD19 | |
| CD9-H8259 | Biotinylated Human CD19, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Her2/ErbB2 | |
| HE2-H822R | Biotinylated Human Her2 / ErbB2, ultra sensitivity (primary amine labeling, long spacer) |
| Her3/ErbB3 | |
| ER3-H8223 | Biotinylated Human ErbB3 / Her3, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| VEGF165 | |
| VE5-H8210 | Biotinylated Human VEGF165, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| FcRn/FCGRT&B2M | |
| FCM-H8286 | Biotinylated Human FcRn / FCGRT & B2M, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| TNF-alpha | |
| TNA-H8211 | Biotinylated Human TNF-alpha, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| TNA-H821R | Biotinylated Human TNF-alpha, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling, long spacer) |
| B7-H4 | |
| B74-H8222 | Biotinylated Human B7-H4, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Siglec-3/CD33 | |
| CD3-H8226 | Biotinylated Human Siglec-3 / CD33, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| FGF | |
| BFF-H8117 | Biotinylated Human FGF basic, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| 4-1BB/TNFRSF9 | |
| 41B-H8258 | Biotinylated Human 4-1BB / TNFRSF9, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CD3E&CD3D | |
| CDD-H82W0 | Biotinylated Human CD3E & CD3D, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CD3 epsilon | |
| CDE-H8223 | Biotinylated Human CD3 epsilon, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| EphB4 | |
| EP4-H8229 | Biotinylated Human EphB4, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| EpCAM/TROP1 | |
| EPM-H8223 | Biotinylated Human EpCAM / TROP1, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| EPM-H8254 | Biotinylated Human EpCAM / TROP1, Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| GM-CSF | |
| GMF-H8214 | Biotinylated Human GM-CSF, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| GPA33 | |
| GP3-H8224 | Biotinylated Human GPA33, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| TFPI | |
| TFI-H8226 | Biotinylated Human TFPI, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Protein L | |
| RPL-P814R | Biotinylated Recombinant Protein L, ultra sensitivity (primary amine labeling, long spacer) |
| IL-6 | |
| IL6-H8218 | Biotinylated Human IL-6, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| IL-1 alpha | |
| ILA-H8213 | Biotinylated Human IL-1 alpha / IL-1F1, epitope tag free, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Mesothelin | |
| MSN-H8223 | Biotinylated Human Mesothelin / MSLN (296-580), ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| MSN-H826x | Biotinylated Human Mesothelin / MSLN (296-580), Fc Tag, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| SCF/KITLG | |
| SCF-M8228 | Biotinylated Mouse SCF / KITLG, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| SOST/Sclerostin | |
| SOT-H8245 | Biotinylated Human SOST / Sclerostin, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| Transferrin R/CD71 | |
| TFR-H8243 | Biotinylated Human Transferrin R / CD71, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
| CX3CL1 | |
| CX1-H8221 | Biotinylated Human CX3CL1, ultra sensitivity (primary amine labeling) |
Mabsol® biotynylated protein collectionの特徴
高品質ヒトタンパク質
ビオチン化タンパク質を含むACROBiosytems社のタンパク質は、同社独自技術のHEKMax®発現プラットフォームを用いて製造しています。ヒトHEK293細胞にはタンパク質発現宿主として、他の細胞と比較し多くの優れた点があります（下表参照）。最も重要な長所は、HEK293細胞によるタンパク質発現工程は、元来の翻訳後プロセスが存在することであり、このことがタンパク質の高い生物活性と安定性に寄与します。
| Expression Systems | Folding | Phosphorylation | Proteolytic Processing | Glycosylation |
| E.Coli | + | N/A | N/A | N/A |
| Insect Cell | ++ | ++ | + | Poor |
| Plant Cell | +++ | ++ | ++ | Poor |
| CHO Cell | ++++ | +++ | +++ | Non-Human Like |
| Human Cell | +++++ | +++++ | +++++ | Human Authentic |
優れた生物活性と検出感度
ビオチンタンパク質の生物活性は、タンパク質自体の構造と、ビオチン化の方法により決定されます。ACROBiosystems社ではすべてのタンパク質に対して、様々なタグの種類とビオチン化方法を検証し、様々な結合実験により評価をしています。最も成績の良い組み合わせで製品が開発されます。下の図１はその1例です。
図１、様々なビオチン化PD1のfunctional ELISAによる結合活性 (Cat # PD1-H5258)
PD1-Fc(N297A), enzymatically labeled, long spacer
PD1-Fc, chemically labeled, long spacer
PD1-Fc(N297A), chemically labeled, long spacer
PD1-Fc(N297A), chemically labeled
PD1-Fc, chemically labeled
ACROBiosystems社のビオチン化タンパク質は高い生物活性と検出感度を示します。図２が示す通り、ＳAセンサーチップにカップリングしたビオチン化FcRn / FCGRT & B2M (Cat.# FCM-H82W4)は、ハーセプチンと結合します（親和定数：2.24 μM、SPRアッセイ）。また図3に示す通り、ビオチン化VEGF165 (Cat# VE5-H8210)はfunctional ELISAにおいて固定化されたrhVEGFR2と結合します（EC50： 0.5-5 ng/mL）。
図2、SAセンサーチップにカップリングされたBiotinylated Human FcRn / FCGRT & B2M, Avi Tag (Avitag™) (Cat.# FCM-H82W4)は、ハーセプチンに結合します。
図3、biotinylated VEGF165 (Cat# VE5-H8210) がmmobilized rhVEGFR2に結合したELISAアッセイの結果
少ないロット間差異
ACROBiosystems社は同社の商品に対し、常に厳しい品質チェックを行っております。新たに製造した商品に対し、同社内部コントロールを用いて様々な試験が行われます。この試験をパスした商品のみが販売されます。図4ではEGFR-biotinの2つの異なるバッチを示していますが、そのKD値は酷似しており（KD=104 nMと109 nM）、アッセイ結果を区別することはできません。
図4、EGFR-biotin (Cat# EGR-H82E7)の2つの異なるロットのEGFに対する結合試験
さらに、この2ロットをCentuximabに対するELISAアッセイで分析しています（0.2µg/well Centuximab）。
図5、EGFR-biotin (Cat# EGR-H82E7)の2つの異なるロットのELISAアッセイ
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TEL：029-851-9222 FAX：029-851-9220
